AAT Bioquest 16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒 *綠色熒光*

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AAT Bioquest熒光線粒體超氧化物活性試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒 *綠色熒光*  200 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：16060

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒 *綠色熒光*

產(chǎn)品規(guī)格：200 Tests

AAT Bioquest熒光線粒體超氧化物活性試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒 *綠色熒光*  200 Tests，產(chǎn)品說明：

1.    線粒體是細胞超氧化物的主要生產(chǎn)者。產(chǎn)生低至中等水平的超氧化物對于正確調(diào)節(jié)許多基本細胞過程至關(guān)重要，包括基因表達、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和肌肉對耐力運動訓(xùn)練的適應(yīng)。不受控制的線粒體超氧化物產(chǎn)生會引發(fā)細胞氧化損傷，從而導(dǎo)致多種疾病的發(fā)病機制，包括癌癥、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和衰老。細胞內(nèi)線粒體超氧化物的檢測對于了解適當(dāng)?shù)募毎趸€原調(diào)節(jié)及其失調(diào)對各種病理的影響非常重要。細胞計™熒光法細胞內(nèi)超氧化物檢測試劑盒使用我們 du te 的超氧化物指示劑 MitoROS™ 520 來量化活細胞中的超氧化物水平。MitoROS™ 520是細胞通透性的，可以快速和選擇性地檢測線粒體中的超氧化物。與超氧化物反應(yīng)時產(chǎn)生綠色熒光。細胞計™熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒提供了一種靈敏的一步熒光測定，可在孵育一小時后檢測活細胞中的線粒體超氧化物。該試劑盒可用于流式細胞術(shù)和熒光顯微鏡應(yīng)用。

平臺

流式細胞儀

Excitation：488 nm 激光

Emission：530/30 nm 濾光片

儀器規(guī)格：FITC頻道

熒光顯微鏡

Excitation：FITC過濾器套件

Emission：FITC過濾器套件

推薦板：黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格：FITC過濾器套件

組件

組件 A：MitoROS™ 520—1瓶

組分B：檢測緩沖液—1 瓶 （20 mL）

組件C：DMSO—1 瓶 （100 μL）

1.    在生長培養(yǎng)基中制備細胞

2.    用測試化合物處理細胞以誘導(dǎo)超氧化物

3.    添加 MitoROS™ 520 工作溶液

4.    將細胞在 37°C 下孵育 1 小時

5.    使用FITC熒光組監(jiān)測熒光

實驗方案摘要（流式細胞術(shù)）

1.    在生長培養(yǎng)基中制備細胞

2.    用測試化合物處理細胞以誘導(dǎo)超氧化物

3.    加入 MitoROS™ 520 儲備溶液，并將細胞在 37°C 下孵育 1 小時

4.    使用530/30 nm濾光片（FITC通道）的流式細胞儀監(jiān)測熒光強度

重要注意事項：使用前在室溫下解凍所有組件。

儲備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1. MitoROS 520儲備溶液（500X）：

將50μLDMSO（組分C）加入MitoROS™™ 520（組分A）的小瓶中并充分混合。注意：25 μL 重構(gòu)的 MitoROS™ 520 儲備溶液足以用于 1 個板。注意：未使用的部分可以等分并在<-20°C下儲存超過一個月，如果管子密封嚴密并保持避光。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

工作溶液的制備

僅適用于熒光顯微鏡

將 5 μL 500X DMSO 重構(gòu)的 MitoROS™ 520 儲備溶液加入 2 mL 檢測緩沖液（組分 B）中并充分混合。注意：這種工作溶液不穩(wěn)定，需要在使用前新鮮制備。

實驗方案樣本

對于熒光顯微鏡/96孔微孔板：

1.    在培養(yǎng)基或所需的緩沖液（如 PBS 或 HHBS）中用 10 μL 10X 測試化合物（96 孔板）或 5 μL 5X 測試化合物（384 孔板）處理細胞。對于對照孔（未處理的細胞），加入相應(yīng)量的復(fù)合緩沖液。

2.    為了誘導(dǎo)超氧化物，將細胞在37°C下孵育所需的時間，避光。注意：我們用 264 μM 抗霉素 A （AMA） 在 7°C 下處理 RAW 5.37 巨噬細胞 2 小時以誘導(dǎo)超氧化物。有關(guān)詳細信息，請參見圖 1。

3.    將 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 MitoROS™ 520 工作溶液添加到細胞板中。

4.    將細胞在37°C孵育1小時，并使用帶有FITC濾光片組的熒光顯微鏡拍攝圖像。

對于流式細胞儀：

1.    根據(jù)需要處理細胞。

2.    為了誘導(dǎo)超氧化物，將細胞在37°C下孵育所需的時間，避光。注意：我們用50μM 抗mei素 A （AMA）在37°C下處理Jurkat細胞2小時以誘導(dǎo)超氧化物。

3.    將 1 μL/0.5 mL 的 MitoROS™ 520 儲備溶液 （500X） 細胞加入細胞中。

4.    將細胞在 5% CO 中孵育₂，37°C培養(yǎng)箱1小時，并使用帶有530/30nm濾光片（FITC通道）的流式細胞術(shù)監(jiān)測熒光強度。

產(chǎn)品訂購信息：

16060  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測試劑盒 *綠色熒光*  200 Tests